微生物檢測儀、耗材及配件_北京德之杰啤酒技術有限責任公司

德樂NBB培養基系列培養基含有豐富的營養物質和促進啤酒有害菌生長的物質，以及模擬啤酒有害菌生長繁殖環境的有效成分。這些特點使NBB產品二種形式中的任何一種都可以快速可靠的檢測出任何啤酒有害菌。培養時間的快慢取決于微生物起始細胞數、微生物種屬、啤酒污染程度、微生物的生理條件等幾點因素。對于較為嚴重的污染，1天的培養就足夠了，對于輕微的污染或生長非常緩慢的微生物（如林特奈乳酸桿菌），多數情況需要幾天的時間。經驗得出，為了達到切實可靠的檢測結果，培養溫度應在25-28℃，NBB-A應在培養5天以后做結果鑒定，NBB-B則需要7-12天，NBB-C需要培養4-8天。與其他檢測方法相比較（在幾天時間內）和一般的保質期樣品（在幾周時間內），NBB產品更快速有效，特別是針對于輕微的污染（樣品中只有1個微生物）和難以檢測出的啤酒有害菌。在正確的培養條件下，所有啤酒有害菌都可以在NBB上清楚的生長，而那些無害的伴生細菌將被抑制。NBB產品對有害菌的選擇性使其能夠適用于不同種類的樣品。

產品介紹

NBB-A—NBB-Agar，固體瓊脂培養基，經過簡單的熔化過程即可倒入板中。可用于膜過濾，拭子和傾倒板法以及空氣中微生物的收集

通過指示器從紅色變為黃色的簡單直觀檢查

NBB-A培養基使用方法：

1．培養

用沸水或高壓蒸汽液化培養基。在液化時應避免超長時間和過度的加熱。已液化的培養基應立即倒入平板中（約15毫升）,儲存在冰箱中，并應在隨后幾天內使用(不應長期儲存)。

恒溫25-28℃在厭氧環境下(CO2)培養。如果樣品中有大量的啤酒有害菌，那么，在1-5天內培養基中的酸堿指示劑將因產酸而變黃。

在樣品中只有很少量的啤酒有害菌的情況下，NBB-A培養基只有菌落周邊區域變黃。并且顏色的改變需4-6天發生。

NBB-A培養基的培養時間比別的培養基相比短得多。恒溫培養時間取決于以下因素：微生物的生長速率(取決于種屬)、菌齡、生理條件以及培養的環境、微生物的起始細胞數。

啤酒有害菌的菌落形態：在短時間的恒溫培養之后，菌落是透明無色的乃至接近白色。在較長的恒溫培養之后，菌落呈白色至黃色，菌落直徑在0.5-3.0mm之間。

2．對NBB-A使用效果的評價此培養基使用于培養已發現的所有的啤酒有害菌，特別適合于乳酸桿菌、四聯球菌以及果膠桿菌和巨球菌。在培養果膠桿菌和巨球菌時，必須是絕對的厭氧條件。

伴生細菌：酵母在NBB-A培養基上只能極其微弱的生長或根本不能生長。非啤酒有害菌在NBB-A上生長的概率很?。ɡ纾盒∏蚓?、醋酸菌，在非厭氧條件下可能長出）。當伴生細菌生長時，因為它們是非啤酒有害菌，所以通常NBB不變黃。同時，在NBB-B上伴生的生長是非常微弱緩慢的。并且，這些細菌在啤酒或釀造酵母中出現的幾率也非常小。

3．應用

a)酵母樣品

取0.1至1.0ml酵母樣品涂布,接種在NBB-A平板上。要求涂層薄而均勻，被涂上的酵母幾乎不在NBB-A上進一步生長，相反，酵母樣品中存在的啤酒有害菌卻生長良好，因此，很容易在顯微鏡下看出來。在大多數情況下，特別是在強烈感染啤酒有害菌的情況下，NBB-A變黃。

b)啤酒樣品（清酒、成品酒、水樣）

膜過濾后，把過濾膜放在NBB-A平板上。

最好用普通孔徑（0.45um）的白色過濾膜。

NBB-B：液體培養基，用于檢測酵母樣品的，帶有指示劑染料的液體培養基，用于檢測酵母樣品中的啤酒變質微生物或作為富集培養基。

直接使用液體介質，通過指示器從紅色到黃色的簡單直觀的篩選。

NBB-B培養基使用方法：

NBB-B應該重新分裝在無菌試管中(約10-20ml),在無菌狀態下分裝或分裝后再次短時殺菌。短時殺菌時應避免強熱，因為強熱使已形成的輕微的蛋白質沉淀加強，同時顏色指示劑顏色加深，最后其他營養物質和酒花苦味物質也受到不好的影響。培養最好在厭氧(CO2)或含氧量低的環境下進行,25-28℃培養2-5天。為保證氣體的交換，試管應使用一個透氣的塞子(棉塞或海綿等產品)。

a)酵母樣品

約0.5ml酵母樣品置于10mlNBB-B中進行恒溫培養。按此比例可以用更多的NBB-B來檢測更多的樣品量。在酵母被NBB-B抑制生長的同時，啤酒有害菌迅速的生長，能夠很容易地在顯微鏡下看出來。并且通常在有啤酒有害菌的情況下，NBB-B會變黃。在某些時候NBB-B變黃不徹底，或者根本不變黃，雖然樣品中有害的四聯球菌存在，這是因為樣品僅有極輕微的污染或自溶的酵母產堿防礙了指示劑變黃。

b)啤酒樣品

將過濾膜放在NBB-B中恒溫培養。當啤酒有害菌存在時，產生混濁、沉淀或混濁沉淀同時產生，同時NBB-B顯著變黃。

NBB-C：濃縮的液體培養基，通過添加酵母渾濁的啤酒樣品可以調節所需的選擇性，具有更高選擇性的液體培養基。只需添加到啤酒樣品中進行分析，最終顯微鏡檢查，無指標驗證

NBB-C培養基使用方法：

將啤酒樣品（100-150ml）裝入180ml取樣瓶中，加5%NBB-C（約8ml)然后用無菌水填滿取樣瓶。

NBB-C可以進一步用來檢查在水或麥汁中的啤酒有害菌。為此，先將樣品（約50ml）裝入180ml取樣瓶中，加5%NBB-C，然后用巴氏殺菌的啤酒補滿取樣瓶（不要使用太高苦味值的啤酒）。

加過NBB-C的樣品必須在26-28℃培養4-8天。NBB-C不含酸堿顏色指示劑，但是啤酒有害菌生長非常迅猛，很容易在顯微鏡下識別出來。樣品有很高的選擇性，因此，伴生的非啤酒有害菌不能生長。

NBB-P使用方法：

NBB-P：盒裝半成品粉末用于配置NBB-B和NBB-A。更經濟的解決方案。

配置方法：

稱量60gNBB-P粉末倒入0.5L啤酒中，用蒸餾水補足到1L。加熱到80℃溶解，然后冷卻到25℃，測其PH值。用氫氧化鈉調PH值至5.80。

（注意：不能滴定過度，如用氫氧化鈉調PH值太高，此溶液只能倒掉，不能用鹽酸中和。）

1、配置NBB-B

將上述調配好的溶液分裝到帶棉塞的試管中，（試管最好先滅菌過），每支試管中分裝10ml NBB-B溶液。然后在0.5bar滅菌10min即可。

2、配置NBB-A

在上述調配好的溶液中加1.5%的無水瓊脂（1.5g/100ml），短時煮沸溶解，然后趁熱分裝到250ml三角瓶或試管中（用于穿刺培養），包扎好，0.5bar滅菌10min。滅菌后，分裝到三角瓶中的NBB-A趁熱到平板。

保存：

NBB-B和NBB-A滅菌完后要送到恒溫培養箱25-28℃有氧培養2天，若無細菌生長，即可放入冰箱中備用。在平板外面每10套包扎一層錫箔紙，試管則若干支試管外面包裹牛皮紙，于4℃左右保存。所制備出的培養基不應長期保存，最好在兩周之內用完。